La détection des staphylocoques par fluorescence repose sur le principe suivant : les bactéries sont cultivées sur un milieu contenant un substrat fluorogène. Les staphylocoques, particulièrement S. aureus, produisent une enzyme (phosphatase) qui dégrade ce substrat. Cette dégradation produit un composé qui émet une fluorescence bleue-verte caractéristique lorsqu’il est exposé aux UV. Ce qui permet d’identifier rapidement et spécifiquement les colonies de staphylocoques.
Qu’est ce qu’un substrat fluorogène? Il s’agit d’une molécule qui n’est pas fluorescente à l’état initial, mais qui le devient après avoir été transformée par une enzyme.
Pour mieux comprendre avec une analogie simple :
- Considérons un bâton lumineux (de type bracelet fluorescent) avant d’être cassé : les produits chimiques sont séparés, il n’y a pas de lumière.
- Quand le bâton est cassé, les produits se mélangent et réagissent, créant la fluorescence.
C’est le même principe avec un substrat fluorogène :
- Au départ, la molécule est « inactive » (non fluorescente)
- L’enzyme des staphylocoques (la phosphatase) « casse » ou modifie cette molécule
- Cette transformation libère un composé qui, lui, est capable de fluorescer sous UV
Dans le cas des tests pour staphylocoques, on utilise souvent le 4-methylumbelliferyl phosphate (4-MUP) comme substrat fluorogène. Une fois transformé par l’enzyme, il produit du 4-methylumbelliferone qui émet une fluorescence bleue caractéristique.
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